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技術(shù)簡(jiǎn)介

      實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記物，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過(guò)擴(kuò)增曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。熒光定量PCR不僅實(shí)現(xiàn)真正實(shí)現(xiàn)了絕對(duì)定量，而且具有靈敏度和特異性高，能實(shí)現(xiàn)多重反應(yīng)、自動(dòng)化程度高、無(wú)污染、實(shí)時(shí)和準(zhǔn)確等特點(diǎn)。隨著生物芯片技術(shù)和熒光探針定量技術(shù)的結(jié)合，熒光定量PCR在醫(yī)學(xué)檢測(cè)及其他各個(gè)領(lǐng)域中的應(yīng)用前景十分廣闊。

技術(shù)原理

      熒光定量PCR所使用的熒光基團(tuán)可分為兩種：熒光探針和熒光染料。

使用SYBR熒光染料法來(lái)進(jìn)行熒光定量PCR時(shí)，我們首先在PCR反應(yīng)體系中加入過(guò)量SYBR熒光染料。SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后發(fā)射一定量的熒光信號(hào)，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射熒光信號(hào)，從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。

      Taqman探針則是利用探針與模板的特異性結(jié)合的特點(diǎn)，以及探針內(nèi)熒光報(bào)告基團(tuán)和淬滅基團(tuán)的分子特性來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)PCR進(jìn)行定量檢測(cè)。這種方法可以實(shí)現(xiàn)高靈敏度，嚴(yán)格針對(duì)特定堿基序列的定量實(shí)驗(yàn)。

應(yīng)用領(lǐng)域

1. 臨床疾病診斷

      各型肝炎、艾滋病、禽流感、結(jié)核、性病等傳染病診斷和療效評(píng)價(jià)；地中海貧血、血友病、性別發(fā)育異常、智力低下綜合癥、胎兒畸形等優(yōu)生優(yōu)育檢測(cè)；腫瘤標(biāo)志物及瘤基因檢測(cè)實(shí)現(xiàn)腫瘤病診斷；遺傳基因檢測(cè)實(shí)現(xiàn)遺傳病診斷。

2. 動(dòng)物疾病檢測(cè)

      禽流感、新城疫、口蹄疫、豬瘟、沙門菌、大腸埃希菌、胸膜肺炎放線桿菌、寄生蟲(chóng)病等、炭疽芽孢桿菌。

3. 食品安全

      食源微生物、食品過(guò)敏源、轉(zhuǎn)基因、乳品企業(yè)阪崎腸桿菌等檢測(cè)。

4. 科學(xué)研究

      醫(yī)學(xué)、農(nóng)牧、生物相關(guān)分子生物學(xué)定量研究。

服務(wù)內(nèi)容

注：1. 提供免費(fèi)的預(yù)實(shí)驗(yàn)，提供免費(fèi)的內(nèi)參組；

      2. 每一個(gè)樣品都包含三個(gè)實(shí)驗(yàn)重復(fù)。

服務(wù)流程

樣品與實(shí)驗(yàn)結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果示例